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          우리나라의 의학기술도 이제는 선진국들과 대등하게 발전해 가고 있음은 주지의 사실이며 최근에는 배아줄기세포을 이용한 각종 진단이나 치료방법들이 개발되고 있는 실정이다. 이는 모두가 세포배양이 가능해졌기 때문이라 할 수 있다
          세포배양학개론
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          출판사 고려의학
          저자 김태전외
          출판년도 2004년
          ISBN 89-7043-413-5
          판형 1판
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          책소개
          우리나라의 의학기술도 이제는 선진국들과 대등하게 발전해 가고 있음은 주지의 사실이며 최근에는 배아줄기세포을 이용한 각종 진단이나 치료방법들이 개발되고 있는 실정이다. 이는 모두가 세포배양이 가능해졌기 때문이라 할 수 있다.
          과거 10여년전만 하더라도 세포배양이란 매우 제한적이고, 한정적이였으나 오늘에는 동식물 분야를 막론하고 각계 각층에서 활발히 연구되고 있어 의생물학 분야에 새로운 센세이숀을 일으키고 있다.
          이제는 임상병리기술학(진단검사기술학) 분야에서도 과거의 환자를 대상으로 한 진단검사기술 교육 중심에서 한 차원 up grade된 세포배양에 따른 이론과 기술 교육이 필요한 시기가 도래했다고 본다. 한편 임상병리기술학(진단검사기술학)을 전공하는 학생들에게도 이러한 기술을 습득케 하므로써 취업의 문을 넓혀주는 기회가 될 것으로 생각된다.
          본 저자들은 임상병리기술학(진단검사기술학)을 전공하는 학생들과 세포배양에 관심 있는 사람들에게 아주 초보적인 이론과 기술을 학습시킬 만한 지침서가 없음을 아쉽게 여겨 오던 중, 교육인적자원부의 재정지원 특성화 사업 중 교재개발 사업의 일환으로 세포배양학에 관한 원고를 집필하여 세포배양학 개론을 펴내게 되었다. 초판이라 부족한 점이 많이 있을 것으로 생각되나 앞으로 내용을 좀더 보완하고, 수정하여 부끄럽지 않은 책자가 되도록 최선을 다할 것을 다짐하는 바이다.


          목차

          제 1 부

          제 1 장 세포의 형태와 기능 1

          제1절 세포의 구성 1
          제2절 핵(Nucleus)의 구조 3
          1. 핵막(Nuclear membrane, Nuclear envelop) 3
          2. 핵즙(Karyolymph) 4
          3. 염색질(Chromatin) 5
          4. 핵인(Nucleolus) 6
          제3절 세포질의 구조 7
          1. 세포질막(Cytoplasmic membrane, Cell membrane) 7
          2. 세포질막에 존재하는 특수구조 9
          3. 세포질기질(Cytoplasmic ground substance) 11
          4. 세포질 내 소기관(Intracytoplasmic organelle) 11
          제4절 세포의 생활제사(Life cycle of cells=세포주기, Cell cycle) 16
          1. 세포의 생활사에 따른 핵 내 DNA 양의 변화 17
          2. 세포분열의 종류 19
          제5절 이상세포(Abnormal cell)의 정의 20


          제 2 장 조직의 구성 21

          제1절 상피조직(Epithelial tissue) 22
          1. 상피조직의 구조에 따른 분류 22
          2. 상피를 구성하는 세포의 종류와 상피구조에 따른 분류 23
          제2절 결합조직(Connective tissue) 28
          제3절 근조직(Muscular tissue) 30
          제4절 신경조직(Nervous tissue) 31


          제 3 장 인체의 발생 35

          제1절 발생학(Developmental anatomy) 개론 35
          제2절 생식자발생(Gametogenesis) 36
          1. 정자발생(Spermatogenesis) 36
          2. 난자의 발생(Oogenesis) 39
          제3절 수정(Fertilization) 41
          제4절 초기 인체의 발생 41
          제5절 태막(Fetal membrane) 및 태반(Placenta)의 형성 44


          제 4 장 맥관계통 49

          제1절 혈액(Blood) 49
          제2절 혈구(Blood cells, Blood corpuscles) 50
          1. 적혈구(Erythrocyte, Red blood cell) 50
          2. 백혈구(Leukocytes, White blood cell) 51
          3. 혈소판(Blood platelets) 53
          제3절 조혈기관(Hematopoietic or organs) 54
          1. 혈관(Blood vessels) 54


          제 5 장 신경계통 59

          제1절 신경조직(Nervous tissue) 59
          1. 신경세포(Nerve cell) 60
          2. 중추성아교세포(Neuroglial cells) 63
          제 2 절 신경계의 발생 65
          1. 신경조직의 분화 65
          2. 중추신경계통(Central nervous system) 65
          3. 뇌실계통(Ventricular system) 66
          4. 맥락얼기(Chroid plexus) 66


          제 6 장 면역학 67

          제1절 면역학의 역사적 배경 67
          제2절 면역학의 개념 69
          1. 면역이란 ? 69
          2. 면역반응의 특수성 70
          3. 면역기구와 면역세포 70
          4. 항원인지에 관여하는 분자 72
          5. 면역반응 74
          6. 항원(Antigen) 76
          7. 면역세포들의 역할 77
          8. 면역세포의 항원인지 78
          9. 면역반응에 의한 숙주방어 80
          10. 면역반응 조절 81
          11. 임상적으로 응용이 가능한 분야 82


          제 7 장 분자생물학 85

          제1절 유전과 유전자(DNA) 86
          1. 유전자와 염색체 86
          2. 유전자와 효소 88
          3. 유전물질로서의 DNA 89
          4. DNA의 구조 91
          5. DNA의 복제 92
          제2절 유전정보의 발현(Expression of genetic information) 94
          1. 유전자와 단백질의 대응직선성(Colinearity of genes and proteins) 94
          2. 전령 RNA의 역할(The Role of Messenger RNA) 95
          3. 유전부호(Genetic code) 97
          4. RNA virus와 역전사(RNA viruses and reverse transcription) 99
          제3절 재조합 DNA 101
          1. 제한 효소들 101
          2. 재조합 DNA분자의 생산 103
          3. 재조합 DNA를 위한 매개체들(Vactors) 106
          4. DNA 염기서열 결정 108
          5. Clon된 유전자들의 발현 109
          6. 중합효소연쇄 반응에 의한 DNA의 증폭 109
          제4절 핵산과 단백질의 검출 112
          1. 핵산 혼성화(Nucleic acid hybridization) 112
          2. PCR에 의한 소량의 DNA와 RNA검출 115
          3. 단백질에 대한 탐침으로서 항체들 115
          4. 재조합 DNA Libraries를 Screening하기 위한 탐침들 117
          제5절 진핵생물에서 유전자 기능 119
          1. 효모에서의 유전학적 분석 119
          2. 동물과 식물세포에 유전자 전달 120
          3. Cloning한 DNA의 돌연변이화 123
          4. 세포성 유전자에 돌연변이 유발 124


          제 8 장 임상피부학 127

          제1절 발생학(Embryology)적인 피부 128
          1. 표피(Epidermis) 128
          2. 표피 부속기(Epidermal appendage, Adnexa) 130
          3. 진피(Dermis) 131
          4. 진피 표피 경계부(Dermo-epidermal junction) 132
          제2절 표피(Epidermis)의 구성세포 132
          1. 각질형성세포(Keratinocyte) 132
          2. Melanin 세포(Melanocyte) 136
          3. Langerhans 세포(Langerhans cell) 138
          4. Merkel 세포(Merkel cell) 140
          5. 진피 표피 경계부(Dermoepidermal junction) 141
          제3절 표피 부속기(Epidermal appendage, Adnexa)의 구성 143
          1. Eccrine 한선 단위(Eccrine sweat unit) 143
          2. Apocrine 한선 단위(Apocrine sweat unit) 144
          3. 모발(Hair) 145
          4. 피지선(Sebaceous gland) 149
          5. 조갑(Nail) 150
          제4절 진피(Dermis)의 결체조직 151
          1. 교원섬유(Collagen fiber) 152
          2. 탄력섬유(Elastic fiber) 152
          3. 기질(Ground substance) 153
          4. 혈관(Blood vessels) 154
          5. 신경(Nerve) 154
          제5절 피하지방층(Subcutaneous fat)의 구성 155
          1. 표피 지질(Lipids of the epidermis)과 투과 장벽(Permeability barrier) 156
          2. 투과 장벽 항상성(Permeability barrier homeostasis) 159
          제6절 피부 노화 (皮膚老化, Skin aging) 162
          1. 노화의 기전 163
          2. 피부노화 164
          3. 흡연과 피부 노화 169
          4. 피부노화의 정신적인 문제 169


          제 2 부


          제 1 장 세포배양학 173

          제1절 세포배양학의 정의 173
          제2절 세포배양학의 종류 173
          1. 동물세포배양학 173
          2. 식물세포배양학(Plant cell culture) 174
          3. 미생물배양학(Microorganism Culture) 174
          제3절 포유동물세포배양의 지식배경 174
          제4절 세포배양학의 응용 175
          1. 세포배양학의 활용 175
          2. 동물세포배양의 분류 175
          3. 동물세포배양의 응용 176


          제 2 장 세포생물학 179

          제1절 세포의 크기와 모양 179
          1. 세포의 구조와 특성 179
          2. 세포의 크기와 모양 179
          제2절 세포의 연구 방법 180
          1. 현미경 180
          2. 세포 분획법 182
          3. 원핵세포와 진핵세포 183
          4. 세포의 구성과 특성 183


          제 3 장 세포배양의 개요 199

          제1절 배양의 조건 200
          1. 세포의 분화 201
          2. 배양대상의 선택 201
          3. 배지 202
          제2절 세포 및 조직의 배양 204
          1. 초대배양과 계대배양(Primary cell culture and subculture) 205
          2. 기초배양법 207


          제 4 장 세포배양용 배지 211

          제1절 배지의 발달 211
          제2절 배지의 물리 화학적 특성 212
          1. pH 212
          2. 이산화탄소와 중탄산염(Bicarbonate) 212
          3. 완충효과(Buffering) 214
          4. 산소(Oxygen) 215
          5. 삼투압(Osmolality) 216
          6. 온도(Temperature) 216
          7. 점성(Viscosity) 218
          8. 표면압과 거품(Surface tension and foaming) 218
          제3절 완충액(Balanced salt solution) 219
          1. 완전 배지(Complete medium) 220
          2. 아미노산 220
          3. 비타민 221
          4. 염 분 221
          5. Glucose 222
          6. 유기물의 공급 222
          7. 호르몬과 성장요소(Hormone and Growth factor) 222
          8. 항생물질(Antibiotics) 222

          제4절 혈청 224
          1. 단백질 224
          2. Growth Factors 225
          3. 호르몬 225
          4. 영양과 대사 225
          5. 지질 226
          6. Minerals 226
          7. Inhibitors 226
          제5절 배지와 혈청의 선택 227
          1. 동물혈청의 무리저장 (Batch reservation of serum) 228
          2. 혈청 실험 229
          3. 열 불활성화 230
          제6절 기타 공급원 230
          1. 태아 추출물 230
          2. 조정된 배지 231


          제 5 장 배양환경 233

          제1절 배양환경 233
          1. 세포의 부착(Cell adhension) 234
          2. 세포의 부착 분자(Cell adhension molecules) 235
          3. 세포의 골격 236
          제2절 세포의 분화(Cell proliferation) 236
          1. Cell cycle 236
          2. 세포 증식의 조절(Control of cell proliferation) 237
          제3절 분화 (Differation) 238
          1. 분화의 유지 238
          2. 탈분화 (Dedifferation) 239
          제4절 에너지 대사 241
          제5절 Cell line의 배양 241
          1. 배양초기 241
          2. Cell line 의 진화 242
          3. 노쇠(Senescence) 243
          제6절 연속성이 있는 Cell line의 개발 243
          제7절 배양 세포의 기원 244


          제 6 장 세포배양시 주요사항과 문제점의 해결 247

          제1절 실험재료의 선택 247
          1. 배양세포의 선택 247
          제2절 배지의 선택 248
          제3절 세포의 배양환경 및 조건의 선택 250
          1. 세포배양시 세포환경을 결정하는 인자 250
          2. 세포배양용 배지와 기구의 준비 251
          3. 세포의 배양 251
          제4절 세포배양시 문제점 및 해결 253
          1. 문제점, 발생원인 및 해결방안 253


          제 7 장 세포배양에 필요한 장치 및 기구 255

          제1절 장치 및 기구 255
          1. Clean bentch (Laminar-flow hood, Biosafety cabinet) 255
          2. 멸균기 256
          3. CO2 배양기 258
          4. 고순도의 물 제조용 이온교환 장치 259
          5. 원심분리기 259
          6. 역상현미경 260
          7. 냉장, 냉동 및 초저온 보관 260
          8. 기타 262

          제 8 장 줄기세포의 임상적 응용 265

          제1절 줄기세포의 정의 265
          제2절 줄기세포의 치료 의학적 활용 266


          제 9 장 유전자치료에 대한 응용 269

          제1절 생체외(In Vivo)에서 낭포성섬유종(Cystic fibrosis) 결함의 치료 269
          제2절 Stem cell의 이용 272
          1. 조혈세포를 이용한 유전자 발현 272
          2. 골수세포의 유전공학적 이용 273
          제3절 유전자 치료 274
          1. 피부의 섬유아세포(Fibroblast)를 이용한 유전자 치료(Gene therapy) 274
          2. 간세포(Hepatocytes)를 이용한 유전자 치료 276
          3. ADA(Adenosin deaminase)결함 환자의 유전자 치료 277
          제4절 근모세포 이식을 이용한 Duchenne의 근이상영양증(Muscular dystrophy)의 치료 278
          제5절 표적세포에 유전자의 직접적인 운반 279
          제6절 변형된 림프구(Transformed lymphocyte)의 이용 280
          제7절 유전자치료의 윤리문제 281


          제 10 장 염색체분석의 임상적 응용 283

          제1절 염색체 분석의 의미 283
          제2절 염색체 분석 284
          1. 염색체 분석의 역사와 의의 284
          2. 염색체 검사의 적용 285
          3. 염색체 검사의 개요 285
          제3절 염색체 검사의 방법 286
          1. 재료 및 방법 286
          2. 검사의 대상 286
          3. 염색법 288
          제4절 혈액종양의 염색체 분석 방법론 293
          1. 검사방법의 선택 293


          제 11 장 단일 평활근 세포의 임상적 응용 297

          제1절 단일 평활근 세포의 의의 297
          제2절 세포 분리용 효소 298
          제3절 영양액 299
          제4절 분리 조제용 기기류 300
          1. 유리기구 300
          2. 효소 반응용 Incubator 300
          제5절 Guinea pig 맹장띠 평활근 세포의 분리법 300
          1. 평활근 조직의 적출 300
          2. 평형화 301
          3. 효소 반응 301
          4. 효소 반응의 정지 302
          5. Pipetting 302
          6. 분리 조제한 세포의 보존 303
          제6절 단일 평활근세포의 형태 303
          1. 광학현미경 상 303
          2. 주사형 전자현미경 상 303
          3. 투과형 전자현미경 상 304
          제7절 분리한 세포의 수축반응의 측정 305
          1. 반응성의 측정 305
          제8절 단일 세포의 수축 반응성 308
          1. 수축반응성 308
          2. 수축 반응의 불균일성 308


          제 12 장 면역세포를 이용한 분야 311

          제1절 림프계 세포 311
          1. B 림프구 318
          2. T 림프구 319
          3. 림프구 분화 320
          제2절 단핵식세포계 322
          1. 단구/대식세포 322
          2. 항원전달세포 323


          제 3 부

          제 1 장 제세포배양에 일반적으로 사용되는 시약들의 제조방법327

          1. 1M HEPES 327
          2. NaHCO3(Sodium bicarbonate) 327
          3. L-Glutamin(G5763, Sigma, M.W=146.1) 327
          4. Gentamicin 328
          5. Collagenase, Type Ⅱ 328
          6. DNase, TypeⅠ 328
          7. 0.4% Trypan blue 328
          8. 5X Normal saline 328
          9. 70% Etanol 329

          제 2 장 세포배양에 사용되는 배지의 제조 방법 331

          제 1 절 기초배지 제조방법 331
          제 2 절 완전배지(Complete Media) 제조방법 332

          제 3 장 분리된 세포의 계산방법 333

          제 1 절 세포수의 계산 333
          제 2 절 세포생존율(Viability)의 계산 334

          제 4 장 세포의 분리방법 335

          제 1 절 Percoll solution을 이용한 말초혈액의 분리방법335
          1. 준비물 335
          2. 실험방법 335
          제 2 절 CD marker를 이용한 말초혈액의 분리 방법 336
          제 3 절 조직에서 대식세포의 분리 337

          제 5 장 세포배양과 관련된 연구 339

          제 1 절 Cell line을 이용한 실험 339
          제 2 절 분리된 말초혈액을 이용한 Cytokine Gene의 발현을 검색340



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